Brucelose canina: obtenção de antígenos e avaliação pela técnica de imunodifusão em gel de agarose

Resumo

Cães com brucelose causada por Brucella canis apresentam poucos sinais importantes de doença sistêmica e nenhumdeles específico para brucelose. Devido às limitações dos procedimentos bacteriológicos, casos suspeitos devem ser avaliadossorologicamente. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização de antígenos externos e internos de Brucella canis e deBrucel/a ovis, pelo teste de imunodifusão em gel de agarose {IOGA). Antígenos externos e internos foram extraídos por soluçãosalina tamponada e fosfatada {PBS) a quente a partir das cepas RM 6/66 de Brucella canis e REO 198 de Brucella oviscultivadas em Ágar e Caldo Tripticase soja {Meio de Castafleda). Os antígenos externos foram obtidos após centrifugação econcentração do sobrenadante por ultrafiltração. Simultaneamente os sedimentos foram submetidos ao ultra-som ecentrifugados sendo a porção sobrenadante considerado o extrato cru sonicado de B. canis e de B. ovis {antígeno interno).Soro hiperimune anti B. canis e anti B. ovis foram obtidos por inoculação intraperitoneal em coelhos {B. canis e B. ovis ), emcadela {B. canis) e em ovelha {B. ovis) sendo utilizados como controles positivos na avaliação diagnóstica. Para referenciar osantígenos produzidos utilizou-se, ainda, soros de cães provenientes de um canil comercial localizado no Rio de Janeiro, RJ,suspeito de infecção brucélica pela ocorrência de abortos e natimortos. Houve resposta sorológica aos antígenos obtidos e aenfermidade foi confirmada por isolamento do agente etiológico, a partir de hemoculturas, em três animais do canil. Concluiuseque os antígenos externos apresentaram melhor resposta em animais experimentalmente inoculados e em naturalmenteinfectados, mas a confirmação deve ser feita com o antígeno sonicado.