Isolamento e propagação da Ehrlichia canis em células DH82 e obtenção de antígeno para a reação de imunofluorescência indireta

Abstract

Ehrlichia canis, agente etiológico da Ehrlichiose Monocítica Canina, foi obtida a partir de um cão naturalmente infectado epropagada em outro por infecção experimental. A camada de mononucleares deste animal foi separada e inoculada emcélulas macrofágicas de linhagem contínua de origem canina, denominadas DH82. A cultura apresentou-se positiva 18 diaspós a infecção. A propagação da Ehrlichia canis in vitro foi acompanhada a partir da observação de mórulas nas célulaspresentes no sobrenadante da cultura infectada, pelas técnicas de citocentrifugação, inoculação em tubos de Leighton eimunofluorescência direta. O cultivo apresentou cerca de 30% de infecção após o 30º dia, alcançando 80% no 47º, sendo entãodividido a 1:2. As células DH82 permitiram o isolamento de E. canis e foram utilizadas como fonte de antígeno para o teste de imunofluorescência indireta.